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EMSA紫外交联时间是多少

更新时间:2023-04-07   点击次数:463次

EMSA中紫外交联时间怎么确定?将尼龙膜置于滤纸上干燥片刻,在紫外交联仪中将转有DNA的一面向上用120mJ/cm2能量辐照交联,紫外交联仪的紫外传感器会根据当前紫外交联仪的紫外线强度自动计算辐照时间,当辐照能量达到设定值时候,会自动停止辐照。

紫外照射的目的在于使DNA 中的一小部分T 与膜表面带正电的氨基基团之间形成交联(Church and Gilbert 1984)。紫外照射不能过度,否则将造成碱基T之间发生共价结合而降低杂交信号。交联时将膜上带有DNA的一面朝向紫外光源。 

EMSA紫外交联时间设置方法:

紫外交联仪设置时间的步骤:按压智能紫外交联仪UCL-3500操作面板上program按键,选择时间模式,通过数字按键,输入需要照射的时间,然后按压enter按键,这样需要的交联时间就成功设置好了,按star按键,紫外交联仪开始辐照,屏幕显示倒计时时间,交联时间结束后,交联仪紫外灯自动停止运行。

EMSA紫外交联能量

智能紫外交联仪UCL-3500可用于Northern、EMSA blotting、EMSA等膜交联,当使用254 nm波长、能量为120.0mJ/cm2交联时,尼龙模的氨基和DNA的胸腺嘧啶(或RNA的尿嘧啶)之间形成共价键稳定。

EMSA紫外交联能量设置方法:

按压智能紫外交联仪操作面板上program按键,选择能量模式(energy),通过数字按键,输入需要照射的能量(0.120J/cm2),然后按压enter按键,这样需要的交联能量就成功设置好了,按star按键,紫外交联仪开始辐照,屏幕显示剩余能量,交联时间结束后,交联仪紫外灯自动停止运行。


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