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观察绿色荧光蛋白的仪器有哪些?

发布时间:2023-04-06   点击次数:158次

能够激发绿色荧光蛋白的发出荧光的主要有荧光显微镜、荧光体视显微镜、便携式荧光蛋白激发光源、台式荧光蛋白激发光源等产品。荧光显微镜需要对观察的目标进行切样观察,而手持的便携式荧光蛋白激发光源无需破坏观察目标可以直接观察,特别是观察荧光蛋白在种子、愈伤、叶片等的表达,非常方便,佩戴上荧光观察眼镜,打开荧光蛋白激发光源的开关就可以直接观察到荧光表达的效果。

LUYOR-3415RG激发光源效果图

传统的荧光显微镜观测荧光蛋白有很多局限性,上海峰志仪器有限公司代理销售的美国路阳生产的便携式荧光蛋白激发观测灯给转基因研究工作者带来了便捷性,无需取样,打开观测灯直接照射荧光蛋白,肉眼就能清晰看到荧光蛋白在叶片、愈伤、种子、菌落等载体上的表达。无论是绿色荧光蛋白、黄色荧光蛋白红色荧光蛋白,一台观测灯就能直接观测2种荧光蛋白的表达。现上海峰志仪器有限公司技术工程师针对绿色荧光蛋白的观测原理、几种观测方法介绍如下:

绿色荧光蛋白(GFP):

绿色荧光蛋白GFP吸收的光谱峰值为395nm(紫外),并有一个峰值为470nm的副吸收峰(蓝光);发射光谱峰值为509nm(绿光),并带有峰值为540nm的侧峰。虽然450~490nm只是GFP的副吸收峰,但由于该激发光对细胞的伤害小,因此通常多使用该波段光源(多为488nm)。GFP荧光极其稳定,在激发光照射下,GFP抗光漂白能力比荧光素强,特别是在450~490nm蓝光波长下稳定。类似的,GFP融合蛋白的荧光灵敏度远比荧光素标记的荧光抗体高,抗光漂白能力强,因此适用于定量测定与分析。由于GFP荧光的产生不需要任何外源反应底物,因此GFP作为一种广泛应用的活体报告蛋白,其作用是任何其它酶类报告蛋白。但因为GFP不是酶,荧光信号没有酶学放大效果,因此GFP灵敏度可能低于某些酶类报告蛋白,比如萤火虫荧光素酶等。


上海路阳仪器有限公司

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