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用什么荧光灯可以看GFP绿色荧光蛋白

发布时间:2023-02-02   点击次数:383次

用什么荧光灯可以看GFP绿色荧光蛋白?

LUYOR-3415RG便携式双波长荧光灯可与荧光蛋白观察眼镜luv-30A或 luv-50A一起使用直接观察绿色荧光蛋白(GFP)或红色荧光蛋白(RFP)。激发光源与观察眼镜LUV-30A共同使用,可在动物设备的固定位置如层流柜直接观察绿色荧光蛋白(GFP)。LUYOR-3415RG激发光源使用锂电池组供电,可与观察镜luv-30A 或 luv-50A一起使用直接观察绿色荧光蛋白(GFP)或黄色荧光蛋白(YFP)。

绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)

 绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)是一类存在于腔肠动物体内的生物发光蛋白。GFP具有多种优点:易于检测,灵敏度高;荧光性质稳定,耐受性强;易于表达,无细胞毒性;可用于活细胞检测。因此,GFP可作为报告基因用于检测基因表达或调控,或作为融合标签来检测蛋白质分子的定位、迁移、构象变化以及分子间的相互作用,或者靶向标记某些细胞器。


GFP吸收的光谱峰值为395nm(紫外),并有一个峰值为470nm的副吸收峰(蓝光);发射光谱峰值为509nm(绿光),并带有峰值为540nm的侧峰(Shouder)。虽然450~490nm只是GFP的副吸收峰,但由于该激发光对细胞的伤害更小,因此通常多使用该波段光源(多为488nm)。此外,GFP的光谱特性与荧光素异硫氰酸盐(FITC)很相似,两者通常共有一套滤光片。GFP荧光极其稳定,在激发光照射下,GFP抗光漂白(Photobleaching)能力比荧光素强,特别是在450~490nm蓝光波长下更稳定。


类似的,GFP融合蛋白的荧光灵敏度远比荧光素标记的荧光抗体高,抗光漂白能力强,因此更适用于定量测定与分析。由于GFP荧光的产生不需要任何外源反应底物,因此GFP作为一种广泛应用的活体报告蛋白,其作用是任何其它酶类报告蛋白WFBL的。但因为GFP不是酶,荧光信号没有酶学放大效果,因此GFP灵敏度可能低于某些酶类报告蛋白,比如萤火虫荧光素酶等。

观察GFP荧光蛋白方法有:

1.便携式GFP激发光源:

采用便携式GFP激发光源(又叫荧光蛋白观测镜)是zui便捷、zui方便的观察方法,因GFP在470nm有一个很高的吸收峰,采用  470nm激发光源能够激发GFP发出明亮的绿色荧光,在观察gfp荧光时,因为激发光为强烈的蓝色光线,必须佩戴专业的观察眼镜才能观察到清晰的荧光信号。推荐使用美国路阳LUYOR-3415或LUYOR-3410便携式激发光源。

上图为采用便携式GFP激发光源观察到的效果

2. 紫外光源(紫外荧光灯):

采用紫外光源(又叫紫外线灯、黑光灯)观察也非常方便,但如果观察植物,植物叶片的叶绿色在紫外线灯下也会发出荧光,对gfp发出的荧光也会产生干扰,另外,标本长时间在紫外光源照射下对GFP标本组织也会造成破坏。

LUYOR-3415RG荧光蛋白激发光源可野外、实验室原位测定GFP(绿色荧光蛋白)。通过定点观察GFP,可有利于学习如何操纵和提高有用的染色体特性,从而可以筛选出高基因表达的植物。

LUYOR-3415RG荧光蛋白激发光源的应用:

1、 野外、实验室原位测定GFP(绿色荧光蛋白)。

2、 应用于转基因作物研究。

3、 区别可遗传性改良生物体和不可遗传的改良生物体。

4、 用于基因表达的研究。

5、 用于Rhodamine(红色荧光染料)、叶绿素、荧光素的研究。


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