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荧光蛋白观测灯面对众多的光源波段我们该如何选择呢

更新时间:2022-07-08   点击次数:932次
  荧光蛋白观测灯是用来快速观察筛选目标基因表达的工具,荧光蛋白激发观测灯能够观察绿色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白、红色荧光蛋白等多种荧光蛋白的表达。面对多种荧光蛋白该如何快速选择理想的荧光蛋白激发观测灯?
 
  R和L波段:
 
  R波段为450nm,L波段为488nm,这2给波段主要用于观察绿色荧光蛋白。绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,简称GFP)应该在450nm、365nm、488nm里面选一种,因绿色荧光蛋白有近百种,尽管都是绿色荧光蛋白,但激发波长从320nm到500nm都有,在选择激发观测灯时,一定要搞清楚具体是哪种绿色荧光蛋白,这种荧光蛋白的激发主峰在什么波段,有了激发光谱图,选择靠近主峰的波段,就是理想的激发波长。
 
  如果是增强型绿色荧光蛋白,选择450nm或488nm是理想的。那么选择LUYOR-3415荧光蛋白激发观测灯的R波段,如果是野生型GFP(Wild-type GFP,wtGFP),建议选择365nm波段
 
  C波段:
 
  C波段为505nm,主要是用于激发黄色荧光蛋白(Yellow Fluorescent Protein ,YFP)基因的表达。黄色荧光蛋白主要有Citrine, Venus, and Ypet。如果您的载体里面的标记基因用的是Citrine, Venus, and Ypet,那么就选择C波段。
 
  G波段:
 
  G波段为530nm波段,用来激发和观察红色荧光蛋白(Red fluorescent protein,简称RFP) 的表达。红色荧光蛋白常用的有DsRed2,mCherry、mRuby2,tdTomato。
 
  V波段:
 
  V波段:为405nm波段,是用来观察青色荧光蛋白(Cyan Fluorescent Protein简称CFP)的表达,青色荧光蛋白激发波长为405nm,发射波长为485nm,如果您是用的CFP,那么选择V波段.
 
  U波段:
 
  U波段:为365nm波段,是用来观察蓝色荧光蛋白(blue Fluorescent Protein简称BFP)的表达和 野生型GFP(Wild-type GFP,wtGFP),推荐使用便携式高强度紫外线灯。
 
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